微生物的長期保存是一個挑戰(zhàn),這些生物需要在低溫下儲存,并提供盡可能少的干擾,
菌種保存管可以用來解決這個問題。將具有標(biāo)記顏色的25個珠粒包裝并裝在裝有防腐劑的保存管中。洗滌珠子并在其上吸附細(xì)菌。之后,在保存期間將保存管保持在-70℃。當(dāng)需要培養(yǎng)時,只需一個珠子,只需移開保存管并直接在微生物培養(yǎng)基上劃線即可。
A、制備
1、在試管上使用已準(zhǔn)備好的標(biāo)簽和條形碼,并在每支試管中接種一種生物。
2、在無菌條件下打開小瓶蓋。
3、挑選3-4個純培養(yǎng)物的小菌落(18-24h培養(yǎng)物)并將其接種到液體防腐劑中。
4、菌種保存管蓋上蓋子并翻轉(zhuǎn)4-5次以吸附微生物,請勿渦旋。
5、這時,微生物將被吸附到珠子上。應(yīng)當(dāng)?shù)钩鲈摼彌_液,以使接種的珠粒盡可能不含液體,并應(yīng)蓋好瓶蓋。
6、在瓶子上提供的文化條形碼上做一個記錄或其他記錄。
7、將接種的冷凍管保存在-70℃以取得長期效果。
B、復(fù)蘇
1、在無菌條件下,打開瓶蓋并使用無菌接種棒或鑷子去除珠子,合上瓶蓋,并盡快將其放回低溫儲存處。溫度過度變化會降低生物活力。
2、珠子可以直接用于接種固體培養(yǎng)基,也可以滴入合適的液體培養(yǎng)基中。
3、每支試管以可能的相同培養(yǎng)物數(shù)量保存約25次。
菌種保存管為生物的長期保存提供一種方法,在使用中,無菌技術(shù)必須精通才能繼續(xù)確保微生物的完整性。但是它在以下條件下是不能用的。
1、管子有任何滲漏跡象(凍結(jié)存儲)。
2、冷凍管被污染。
3、商標(biāo)的有效期限已被超過。
4、無論如何,將珠子取出后就不能放回冷凍管中。